
Biotin-LC-Sulfo-NHS 是一种水溶性、生物功能化的生物素衍生试剂,具有以下核心特性和应用:
一、结构与组成
生物素核心:生物素(维生素B7)具有与亲和素或链霉亲和素高亲和力结合的特性,为蛋白质和分子标记提供可靠的生物识别功能。 长链连接臂(LC):由6-氨基己酸组成的长链结构,提供标记分子与靶蛋白之间的空间缓冲,减少对靶分子构象和活性的干扰。 末端磺基N-羟基琥珀酰亚胺酯(Sulfo-NHS):水溶性活性酯,可与蛋白质或多肽中的赖氨酸侧链自由胺反应,形成稳定的酰胺键。结构式:
Biotin-LC-Sulfo-NHS,cas:191671-46-2
二、性质与特点
水溶性:磺基基团的存在使Biotin-LC-Sulfo-NHS在水溶液中具有良好的溶解性,无需使用有机溶剂,便于在水性环境中进行标记反应。 膜不渗透性:不能穿透细胞膜,因此可以特异性地标记细胞表面的蛋白质,适用于细胞表面蛋白的研究。 高反应活性:在中性至弱碱性条件下(pH 7.0-9.0),Sulfo-NHS酯能迅速与氨基反应,形成稳定的酰胺键,使标记持久且可靠。 空间缓冲保护:LC长链提供空间隔离,减少生物素标记对蛋白质活性和受体结合能力的影响,保证高效的生物素-亲和素结合。 化学稳定性:在干燥和低温条件下化学稳定,易于储存和运输。展开剩余49%三、制备与使用方法
溶解:Biotin-LC-Sulfo-NHS可直接溶解于PBS(pH 7.2-7.4)、HEPES、MES等缓冲液中。避免使用Tris或甘氨酸缓冲液,因其含有伯胺,可能干扰NHS酯反应。 反应:在目标蛋白或抗体溶液中加入Biotin-LC-Sulfo-NHS,温和搅拌30-60分钟(4°C或室温)。 纯化:反应结束后,可使用Sephadex G-25层析或透析去除未反应的生物素。 检测:通过HABA法计算生物素标记度,使用Western Blot、ELISA或荧光亲和素结合实验验证生物素化蛋白的活性。温馨提示:仅用于科研,不能用于人体!
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